FPLC全稱(chēng)為快速蛋白液相色譜(Fast protein liquid chromatography),其原理與高效液相色譜理論類(lèi)似,是由經(jīng)典的液體柱層析引入氣相色譜理論,并且對(duì)相體進(jìn)行了改革,配用高壓輸液泵,采用高靈敏檢測(cè)器、梯度洗脫裝置、自動(dòng)收集裝置和微機(jī)等發(fā)展起來(lái)的現(xiàn)代液相色譜。
快速蛋白液相色譜(FPLC)簡(jiǎn)介
FPLC為專(zhuān)門(mén)用來(lái)進(jìn)行蛋白質(zhì)、多肽及多核苷酸分離的系統(tǒng),F(xiàn)PLC為近年來(lái)的一項(xiàng)重要革新,其除了對(duì)HPLC的快速、高分辨率等特性加以保持,并且其還具有柱容量大、回收效率高及不易使生物大分子失活等特性。所以近年來(lái),其廣泛應(yīng)用于分離蛋白質(zhì)、多肽及寡核苷酸等方面。伴隨著HPLC的發(fā)展,有薄殼型填料和雙擴(kuò)散灌流型填料兩種新型填料出現(xiàn)了,對(duì)于分離大分子物質(zhì),它們的優(yōu)越性獨(dú)特,從而大大拓展了FPLC的應(yīng)用領(lǐng)域。其能夠進(jìn)行蛋白的含量的測(cè)定以及蛋白的分子量的確定,能夠分離純化蛋白、有機(jī)化合物,所以其在生物學(xué)領(lǐng)域和化學(xué)領(lǐng)域的研究可以得到使用。
近些年以來(lái),在HPLC基礎(chǔ)上發(fā)展出了新型色譜技術(shù),包括低壓液相色譜(LPLC)、中壓液相色譜(MPLC)以及快速蛋白液相色譜(FPLC),在這些新型色譜技術(shù)當(dāng)中,快速蛋白液相色譜(FPLC)可以非常迅速地分離復(fù)雜混合物,能夠在短時(shí)間內(nèi)對(duì)大量樣品加以純化。其特性表現(xiàn)為較大的容量、較高的回收效率以及不易失活的生物大分子等。能夠越來(lái)越廣泛地使用于生命科學(xué)研究及藥物生產(chǎn)上。
FPLC、HPLC應(yīng)用范圍:
FPLC專(zhuān)門(mén)用于分離純化蛋白質(zhì)、多肽及多核苷酸。
HPLC能夠?qū)Φ头悬c(diǎn)低相對(duì)分子質(zhì)量分子、高沸點(diǎn)中分子、高分子有機(jī)化合物(包括極性、非極性)、離子型無(wú)機(jī)化合物、熱不穩(wěn)定生物分子加以分析。