薄層色譜是色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種重要實(shí)驗(yàn)技術(shù),屬固—液吸附色譜,兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點(diǎn),一方面適用于少量樣品(幾微克,甚至0.01微克)的分離;另一方面在制作薄層板時(shí),把吸附層加厚加大,因此,又可用來(lái)精制樣品,此法特別適用于揮發(fā)性較小或較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物質(zhì)。是將吸附劑、載體或其他活性物質(zhì)均勻涂鋪在平面板(如玻璃板、塑料片、金屬片等)上,形成薄層(常用厚度為0.25毫米左右)后,在此薄層上進(jìn)行層析分離的分析方法。
薄層色譜注意要點(diǎn):
1)室內(nèi)溫度,尤其不能太潮濕
2)硅膠和水的比例要合適:2.5-4.5zui佳.根據(jù)自己點(diǎn)樣的粘稠度調(diào)節(jié)
3)研磨,均勻,耐心,不要怕花時(shí)間
4)活化,注意在活化過(guò)程中不要受干擾
5)研磨要細(xì)、調(diào)和均勻,鋪板要注意避免氣泡、厚薄均勻。
薄層色譜注意事項(xiàng)
1、因?yàn)槭歉砂澹伆鍟r(shí)手要平穩(wěn),否則容易不均勻。
2、點(diǎn)樣時(shí)幾個(gè)樣點(diǎn)要在一條直線上,大小要合適(斑點(diǎn)直徑一般不超過(guò)2mm),間距5~6mm。
3、點(diǎn)樣用的毛細(xì)管不能交叉使用。
4、因溶液太稀,一次點(diǎn)樣如果不夠需重復(fù)點(diǎn)樣,則應(yīng)待前次點(diǎn)樣的溶劑揮發(fā)后方可重點(diǎn),以防樣點(diǎn)過(guò)大,造成拖尾、擴(kuò)散等現(xiàn)象,影響分離效果。
5、點(diǎn)樣結(jié)束待樣點(diǎn)干燥后,方可進(jìn)行展開(kāi)。點(diǎn)樣要輕,不可刺破薄層。
6﹑放板時(shí)手要平穩(wěn),否則走出斜線。
制備薄層板所需的儀器與試劑
燒杯(50mL)、載玻片、玻璃棒、1﹪羧甲基纖維素鈉(CMC)水溶液、硅膠G、去離子水