氣相色譜儀色譜峰之間怎樣才算達(dá)到完全分離？首先是兩個(gè)色譜峰的峰間距必須相差足夠大，若兩峰間僅有一定距離，而每一個(gè)峰卻很寬，致使彼此重疊，則兩組分仍無法完全分離；第二是峰寬必須窄；只有同時(shí)滿足這兩個(gè)條件時(shí)，兩組分才能完全分離。
判斷相鄰兩組分在色譜柱中的分離情況，常用分離度R作為色譜柱的分離效能指標(biāo)。R定義為相鄰兩組分色譜峰保留值之差與兩個(gè)色譜峰峰底寬度總和之半的比值。R值越大，意味著相鄰兩組分分離得越好。
因此，分離度R是柱效能、選擇性影響因素的總和，可用其作為色譜柱的總分離效能指標(biāo)。從理論上可以證明，若峰形對(duì)稱且滿足于正態(tài)分布，當(dāng)R<>時(shí)，兩峰有明顯的重疊；R=1時(shí)，分離程度可達(dá)95%，；當(dāng)R=1.5時(shí)，分離程度可達(dá)99.7%，因而可用R=1.5來作為相鄰兩峰已完全分離的標(biāo)志。
氣相色譜儀多個(gè)化合物色譜峰重疊時(shí)，如何提高分離度，使其完全分開？
原因
當(dāng)多個(gè)化合物出峰重疊時(shí)，可采用減小載氣流速、降低柱溫或升溫速率、減小進(jìn)樣量、提高氣化室溫度等措施來提高分離度；當(dāng)改變柱溫和載氣流速也達(dá)不到分離目的時(shí)，就應(yīng)更換更長(zhǎng)的色譜柱，或更換不同固定相的色譜柱，在氣相分析中，色譜柱是分離成敗的關(guān)鍵。化合物出峰重疊的主要原因有：
①載氣流速過快；
②色譜柱溫度過高；
③進(jìn)樣量過大；
④氣化室溫度偏低；
⑤進(jìn)樣時(shí)未選擇合適的分流比分流；
⑥色譜柱長(zhǎng)不夠，導(dǎo)致分離度不夠；
⑦色譜柱型號(hào)選用不對(duì)。
解決方案
①氣相色譜儀載氣類型和流速的選擇
首先要根據(jù)考慮氣相色譜儀使用的檢測(cè)器類型選擇合適載氣。熱導(dǎo)池檢測(cè)器TCD常選用氫或氦氣作載氣，能提高靈敏度，氫載氣還能延長(zhǎng)熱敏元件鎢絲的壽命；氫火焰檢測(cè)器FID用氮?dú)庾鬏d氣，也可用氫氣；電子捕獲檢測(cè)器ECD常用氮?dú)?；火焰光度檢測(cè)器FPD常用氮?dú)夂蜌錃狻?/span>
載氣成分越輕、純度越高，越有利于提高分離度。當(dāng)然，現(xiàn)在的儀器都是固定采用某一種載氣，一般不常更換載氣種類。
載氣流速對(duì)柱效率和分析速度都會(huì)產(chǎn)生影響。根據(jù)范氏方程，載氣流速快，能加快分析速度，減少分子擴(kuò)散，縮短分析時(shí)間，但同時(shí)可能降低分離度；載氣流速慢有利于傳質(zhì)，一般可提高分離度，同時(shí)也可能會(huì)造成峰展寬而降低分離度。所以當(dāng)多個(gè)化合物峰重疊時(shí)，應(yīng)選擇合適的載氣流速。根據(jù)范氏方程，一定的色譜柱對(duì)一定的化合物有一個(gè)蕞蕞佳流速點(diǎn)，這時(shí)候柱效蕞高，分離能力蕞好，但是人們常用“實(shí)用蕞佳流速”即合適的載氣流速。
②氣相色譜儀柱溫的選擇
柱溫直接影響分離效能和分析速度。柱溫低有利于分配，有利于組分分離，但溫度過低會(huì)造成被測(cè)組分在柱上冷凝或傳質(zhì)阻力增加，使色譜峰擴(kuò)張甚至拖尾；柱溫高有利于傳質(zhì)，但會(huì)使分配系數(shù)變小，不利于分離。對(duì)沸點(diǎn)范圍寬、組成復(fù)雜的混合物應(yīng)利用色譜柱的程序升溫技術(shù)，獲得蕞高分離度、蕞短分析時(shí)間的蕞最佳分析結(jié)果。
③氣相色譜儀色譜柱的選擇
色譜柱的選擇是整個(gè)色譜分析條件優(yōu)化過程中蕞重要的一環(huán)。色譜柱選擇是否恰當(dāng)直接決定了分析結(jié)果的準(zhǔn)確性、數(shù)據(jù)的重現(xiàn)性、峰形的美觀等。
毛細(xì)管色譜柱參數(shù)主要包括：固定液極性、柱長(zhǎng)、內(nèi)徑、膜厚等四方面。選擇色譜柱應(yīng)根據(jù)“相似相溶”原理，分析非極性物質(zhì)用非極性色譜柱，極性物質(zhì)用極性色譜柱。根據(jù)固定液極性強(qiáng)弱可以分非極性柱（DB-1或等同的其它品牌）、弱極性柱（DB-5等）、中等極性柱（DB-17等）、強(qiáng)極性柱（DB-WAX等）。
色譜柱中固定液用量對(duì)分離起決定作用。一般來說，載體表面積越大，固定液用量可以越高，允許的進(jìn)樣量也就越多。為了改善液相傳質(zhì)，應(yīng)使液膜薄一些，固定液液膜薄，柱效能提高，可縮短分析時(shí)間；但是膜厚是一個(gè)選擇空間比較大的參數(shù)，膜厚越厚，對(duì)分析物的保留會(huì)增加，保留時(shí)間增大，有助于分離；但是由于傳質(zhì)阻力的增加，柱效又會(huì)降低。因此，如果分析保留弱的物質(zhì)(如一些小分子)，可考慮試試厚液膜的柱子，反之則選擇薄液膜的色譜柱。
對(duì)填充柱來說，要求載體表面積大，表面孔徑分布均勻。固定液涂在載體表面上成為均勻薄膜，液相傳質(zhì)就快，柱效就可提高；載體粒度均勻、細(xì)小，也有利于柱效提高；但粒度過小，柱壓增大，對(duì)操作不利。柱長(zhǎng)對(duì)分離的影響也很明顯。通常色譜柱越長(zhǎng)，理論塔板數(shù)越大，分理效果越好，但是保留時(shí)間增加也很明顯。對(duì)于特別難分離的物質(zhì)，一般應(yīng)選用長(zhǎng)柱。內(nèi)徑對(duì)柱容量和柱效亦有較大影響，內(nèi)徑越小，柱容量會(huì)下降，但柱效會(huì)變高。
④進(jìn)樣時(shí)間和進(jìn)樣量
手動(dòng)進(jìn)樣時(shí)速度必須快，一般應(yīng)在1s之內(nèi)。進(jìn)樣時(shí)間過長(zhǎng)，會(huì)造成峰展寬、前伸或拖尾變形。進(jìn)樣量一般液體0.1-5μL，氣體0.1-10mL。進(jìn)樣太多，會(huì)使色譜峰展寬，造成前伸、拖尾或重疊而分離不好。
⑤氣相色譜儀氣化室溫度的選擇
合適的氣化室溫度既能保證樣品組分瞬間完全氣化，又不引起樣品分解。氣化室溫度一般比柱溫高30-70℃或比樣品組分中最高沸點(diǎn)高30-50℃。在保證不發(fā)生熱分解時(shí)，適當(dāng)提高氣化溫度對(duì)分離及定量均有利。
