液相色譜儀系統(tǒng)中,色譜柱起著分離作用,是色譜儀分析系統(tǒng)的核心部件,色譜柱柱效的高低影響著檢測(cè)速率的快慢以及檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。譜析色譜小編簡(jiǎn)述一下液相色譜儀正向色譜柱使用方法。
液相色譜儀正向色譜柱以硅膠為主要柱填料。按形狀可分為無定形和球形兩種,其粒徑在3-10um之間另一種正相填料是硅膠表面鍵合-CN,-NH2等官能團(tuán)即所謂的鍵合相硅膠
液相色譜儀正相色譜柱的使用方法:
新立柱可直接用于流動(dòng)相建議用正己烷乙腈(99:1)在0.5ml/min流速下沖孔10倍柱體積然后根據(jù)流動(dòng)相選擇極性相近的氯仿或二氯甲烷在相同流速下沖孔10倍柱體積后用流動(dòng)相代替流動(dòng)相。
當(dāng)采用正相時(shí),不適合分析含有醛固酮和羰基的化合物,不應(yīng)用于還原糖的分析。流動(dòng)要完全汽化,不能含有羰基化合物和過氧化物(質(zhì)量較差的乙醚和少量四氫呋喃)。
無論何時(shí)更換流動(dòng)相,都必須確保新的流動(dòng)相和柱的原始保存液是相互溶解的。
正相色譜法 采用極性固定相(如聚乙二醇、氨基與腈基鍵合相);流動(dòng)相為相對(duì)非極性的疏水性溶劑(烷烴類如正已烷、環(huán)已烷),常加入乙醇、異丙醇、四氫呋喃、三氯甲烷等以調(diào)節(jié)組分的保留時(shí)間。常用于分離中等極性和極性較強(qiáng)的化合物(如酚類、胺類、羰基類及氨基酸類等)。