聚酰胺是由己內(nèi)酰胺聚合而成的一類高分子物質(zhì)，由于己內(nèi)酰胺的開環(huán)聚合是一個(gè)復(fù)雜的可逆過程，反應(yīng)平衡后的產(chǎn)物含有一定量的單體和低分子環(huán)狀齊聚物。注射用辛芍凍干粉針的制備工藝中使用了聚酰胺樹脂，由于聚酰胺中的己內(nèi)酰胺對人體的眼睛和中樞神經(jīng)有刺激作用，特別是對腦干，可引起實(shí)質(zhì)性臟器的損害，所以須對己內(nèi)酰胺的殘留量進(jìn)行控制。氣相色譜儀廠家山東譜析采用氣相色譜法測定聚酰胺樹脂中殘留己內(nèi)酰胺單體的含量，以此為聚酰胺處理效果的評價(jià)指標(biāo)之一。
1 儀器與試藥
譜析GC-17氣相色譜儀，氫火焰離子化檢測器；柱：SE-54，OV-1701，F(xiàn)FAP大口徑石英毛細(xì)管柱(30 m×0.53 mm，1 μm，自制)，高純氮?dú)?99.99%)，氫氣(99.99%)，丙酮、乙醇、水楊酸甲酯、鄰苯二甲酸二甲酯、鄰苯二甲酸二乙酯均為分析純，己內(nèi)酰胺(美國ACROS，含量>99%，CAS：105-60-2)，聚酰胺樹脂(30～60目)
2 方法與結(jié)果
2.1 色譜條件色譜柱為FFAP大口徑石英毛細(xì)管柱(30 m×0.53 mm，1 μm)；載氣為氮?dú)猓皦?0 kPa，柱溫175℃，進(jìn)樣口溫度220℃，檢測器溫度280℃，氫氣流速40 ml?min-1，空氣流速400 ml?min-1，進(jìn)樣量1 μl。
2.2 內(nèi)標(biāo)物溶液的制備精密稱取鄰苯二甲酸二甲酯適量，用丙酮制成每毫升含50 μg的溶液,即得。
2.3 對照品溶液的制備精密稱取ε-己內(nèi)酰胺適量，加內(nèi)標(biāo)溶液制成每毫升含ε-己內(nèi)酰胺46.80 μg的對照品溶液。
2.4 供試品溶液的制備
2.4.1 聚酰胺樹脂稱取5 g聚酰胺樹脂，置索氏提取器中，加丙酮適量，加熱回流4 h，丙酮提取液于40℃減壓液蒸干，殘?jiān)芗觾?nèi)標(biāo)液2 ml使溶解，即得。
2.4.2 聚酰胺乙醇洗脫液精密吸取聚酰胺乙醇洗脫液50 ml，于50℃減壓液蒸干，殘?jiān)芗觾?nèi)標(biāo)液2 ml使溶解，即得。
2.5 系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)分別取對照品溶液、聚酰胺樹脂供試品溶液1 μl，注入氣相色譜儀，測定，記錄色譜圖(見圖1)，在本條件下供試品中己內(nèi)酰胺峰和內(nèi)標(biāo)物峰不被雜質(zhì)峰干擾，且與雜質(zhì)峰的分離度大于1.5，理論板數(shù)以己內(nèi)酰胺峰計(jì)算為18 000。
a-對照品 b-供試品溶液 1.己內(nèi)酰胺 2. 鄰苯二甲酸二甲酯
2.6 最低檢出限和定量限 將己內(nèi)酰胺對照品溶液逐步稀釋，測得最小檢出限為1 μg?ml-1 (S/N=3)，按取樣5 g聚酰胺和供試品溶液定容至2 ml計(jì)算，聚酰胺中為0.4 μg?g-1，洗脫液按50 ml取樣最小檢出限為0.04 μg?ml-1 (S/N=10)，見表4。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，線性關(guān)系考察中最低濃度點(diǎn)(5.85 μg?ml-1)為定量限。
2.7 線性關(guān)系考察準(zhǔn)確稱取ε-己內(nèi)酰胺29.25 mg，置50 ml量瓶中，加內(nèi)標(biāo)液溶解并稀釋至刻度，搖勻，得對照品儲(chǔ)備液；精密量取對照品儲(chǔ)備液0.25，0.5，1，2，4，8，16 ml分別置25 ml量瓶中，加內(nèi)標(biāo)液溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別取上述工作液1 μl，注入氣相色譜儀，以己內(nèi)酰胺和內(nèi)標(biāo)物為縱坐標(biāo)(Y)，以己內(nèi)酰胺進(jìn)樣濃度為橫坐標(biāo)(X)，進(jìn)行線性回歸，線性回歸方程為Y=9.83×10-3X-0.016 6，r =0.999 9，線性范圍：5.85～374 μg?ml-1。
2.8 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)稱取未處理的聚酰胺樹脂9份，分別按供試品溶液制備方法制備供試液，照上述色譜條件分別進(jìn)樣，結(jié)果己內(nèi)酰胺峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積比值的RSD為2.9%。
2.9 中間精密度實(shí)驗(yàn)相隔兩天對同一批號聚酰胺中己內(nèi)酰胺進(jìn)行測定,結(jié)果己內(nèi)酰胺峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積比值的RSD分別為4.0%。不同日期、不同分析人員分析結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于5%。
2.10 回收率的測定
2.10.1 聚酰胺樹脂中己內(nèi)酰胺回收率實(shí)驗(yàn)采用加樣回收實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證方法的準(zhǔn)確性，即取已測定含量的聚酰胺樹脂(含量：16.35 μg?g-1)，加己內(nèi)酰胺適量，按供試品溶液制備方法制備供試液，進(jìn)行測定。結(jié)果見表1。表1 聚酰胺中己內(nèi)酰胺回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.10.2 洗脫液中己內(nèi)酰胺回收率實(shí)驗(yàn)采用加樣回收實(shí)驗(yàn)方法驗(yàn)證乙醇洗脫液中己內(nèi)酰胺測定的準(zhǔn)確性，取95%乙醇50ml加入己內(nèi)酰胺適量，50℃減壓干燥，按供試品溶液制備方法制備供試液，進(jìn)行測定。結(jié)果見表2。表2 洗脫液中己內(nèi)酰胺殘留回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.11 樣品測定
2.11.1 聚酰胺樹脂中己內(nèi)酰胺殘留測定 取已處理好的聚酰胺樹脂(40℃減壓干燥)和未處理過的聚酰胺各5 g，按聚酰胺樹脂供試品溶液制備方法制備供試品溶液，測定。結(jié)果見表3。表3 聚酰胺樹脂中己內(nèi)酰胺殘留測定結(jié)果μg?g-1
己內(nèi)酰胺檢出限：0.4 μg?g-1
2.11.2 洗脫液中己內(nèi)酰胺殘留測定 取各次乙醇洗脫液50 ml，50℃減壓干燥，精密加入2 ml內(nèi)標(biāo)液溶解殘?jiān)瑴y定。結(jié)果見表4。表4 乙醇洗脫液中己內(nèi)酰胺殘留測定結(jié)果*：己內(nèi)酰胺定量限：0.2 μg?g-1洗脫液;：己內(nèi)酰胺檢出限：0.04 μg?g-1洗脫液
己內(nèi)酰胺易溶于水、乙醇、丙酮、乙醚、氯仿和苯等溶劑中，實(shí)驗(yàn)選用乙醇、丙酮作為提取溶劑提取聚酰胺樹脂中己內(nèi)酰胺，分別考察了所選溶劑、提取方法、提取時(shí)間的試驗(yàn)，結(jié)果以丙酮為提取溶劑，采用索式提取方法較其他方法有效、省時(shí)。
實(shí)驗(yàn)分別考察了水楊酸甲酯、鄰苯二甲酸二甲酯、鄰苯二甲酸二乙酯等化合物作為內(nèi)標(biāo)物，結(jié)果以鄰苯二甲酸二甲酯作為內(nèi)標(biāo)物在出峰時(shí)間、與雜質(zhì)的分離情況均較為合適。
