高效液相色譜儀(HPLC)是分析實(shí)驗(yàn)室常用的測(cè)試儀器之一，其應(yīng)用越來(lái)越廣泛，色譜柱作為高效液相色譜儀的重要組成部件，在分析檢測(cè)中能否較好的分離和測(cè)定其性能起到關(guān)鍵性的作用，同時(shí)也是最主要的耗材。從降本增效方面考慮，延長(zhǎng)其使用壽命就顯得尤為重要。我們需要主要注意以下幾點(diǎn)：
一、加裝保護(hù)柱
色譜柱作為高效液相色譜儀的主要耗材，價(jià)格國(guó)產(chǎn)的在1000元左右，進(jìn)口的像資生堂大都在2000-3000元，保護(hù)柱套（一次性投資）價(jià)格在600-800元，柱芯平均一個(gè)在100-200元，隨著做樣次數(shù)的增加色譜柱不可避免的出現(xiàn)柱效下降，分離度降低，為了延遲出現(xiàn)這種情況，最直接有效的方法就是加裝預(yù)柱。
二、經(jīng)常清洗
柱子在做樣過(guò)程中難免會(huì)被樣品帶入的雜質(zhì)污染流動(dòng)相大多為緩沖鹽溶液，如果不及時(shí)清洗就會(huì)留在柱子當(dāng)中，結(jié)晶難以清洗，建議每次清洗時(shí)間不少于2小時(shí)，最后保存在100%的甲醇或者乙腈當(dāng)中。
做樣時(shí)間長(zhǎng)了以后一些不溶物和難溶物會(huì)附著在整個(gè)流路當(dāng)中，或多或少會(huì)隨著流動(dòng)相被沖洗到色譜柱當(dāng)中滯留其中，所以對(duì)色譜儀也要定期進(jìn)行清洗，根據(jù)檢測(cè)物質(zhì)的不同用相應(yīng)的試劑進(jìn)行清洗。
三、流動(dòng)相過(guò)濾
流動(dòng)相大多用鹽溶液配制，不可避免的有少量不溶物，如果不過(guò)濾，一些微小的顆粒物質(zhì)就會(huì)進(jìn)入色譜柱，時(shí)間一長(zhǎng)就會(huì)造成色譜柱堵塞，根據(jù)所用色譜儀管路直徑的大小選擇合適的濾膜，一般是0.45μm，有些進(jìn)口儀器需要用0.22μm。
四、使用進(jìn)口試劑
進(jìn)口試劑雜質(zhì)少，不會(huì)污染色譜柱。
五、做樣前后要徹底清洗
做樣前由于色譜柱內(nèi)甲醇或乙腈長(zhǎng)時(shí)間放置，所在開(kāi)機(jī)進(jìn)行沖洗時(shí)，流速不要太大，建議用0.5ml/min的流速進(jìn)行過(guò)渡。
做樣后色譜柱內(nèi)殘留大量流動(dòng)相和樣品帶入的雜質(zhì)（參照第二條）。
六、選擇合適的方法
不同的檢測(cè)項(xiàng)目有對(duì)應(yīng)不同的方法，在樣品預(yù)處理過(guò)程在保留目標(biāo)物質(zhì)的前提下盡量將雜質(zhì)去除干凈，這樣不僅可以保護(hù)整個(gè)流路系統(tǒng)，而且也降低了雜質(zhì)對(duì)目標(biāo)峰的干擾，進(jìn)而可以提高檢測(cè)的準(zhǔn)確度。
七、色譜柱拖尾
色譜柱拖尾一般是柱頭污染，具體做法如下：
1、將柱子入口（拖尾首先會(huì)污染入口）污染部分的填料去掉，盡量多去掉一些，把污染的填料全部去除；
2、去除的時(shí)候要用干凈的工具，個(gè)人建議用一次性注射器；
3、經(jīng)過(guò)修復(fù)的色譜柱，在使用前一定要做回收率測(cè)試，達(dá)到國(guó)標(biāo)要求的80-110%，不對(duì)稱(chēng)因子為0.90-1.15方可投入使用。
八、檢測(cè)及清洗用水
作為反相色譜用到最多的就是水，因此水的潔凈程度也是影響色譜柱使用壽命的重要因素，建議用桶裝的娃哈哈純凈水，如果用量較大可以考慮用純水機(jī)制備超純水（過(guò)濾后的超純水建議在4小時(shí)內(nèi)用完）。
九、色譜柱色譜峰前延
這種情況下柱子基本報(bào)廢了，無(wú)法修復(fù)。報(bào)廢的柱子也要充滿(mǎn)100%的有機(jī)溶劑，卸下以后兩端用堵頭堵死，柱內(nèi)未污染的填料可以用來(lái)修復(fù)拖尾的色譜柱。
