高壓泵是關(guān)鍵部件之一,按原理分為兩種類型:一類是恒流泵,一類是恒壓泵。恒流泵,無論色譜柱的阻力如何變化、無論外界有何影響,它輸出的流動相的流速可以基本保持不變,這正好是液相色譜儀系統(tǒng)工作的基本要求;而恒壓泵輸出的基本上是恒定不變的壓力,在正常情況下,由于液相色譜儀系統(tǒng)的阻力不會變化,所以恒壓也可以達到恒流的效果。但是由于色譜柱、溫度等可能會有變化,所以可能導(dǎo)致流量變化,這是HPLC使用者不希望看到的結(jié)果。所以一般來講,恒流泵比恒壓泵好(橫流泵的使用多于恒壓泵)。目前我國有近20家企業(yè)在生產(chǎn)各種不同類型的液相色譜儀,但是基本上都是采用恒流泵;例如:山東譜析公司的LC3000系列、北京東西電子的LC-5510、 北京瑞利公司的SY-8100 、大連依利特公司的5100、上海伍豐公司的LC100、上海儀電公司的LC210、浙江福立公司的LC1190等等儀器都是采用的高壓恒流泵輸液。
高壓泵的質(zhì)量直接影響整個儀器的質(zhì)量,是用戶關(guān)注的核心部件之一。LC高壓泵的重要性及使用者對高壓泵的具體要求如下:
(1)耐高壓
耐高壓是液相色譜儀系統(tǒng)對高壓泵的基本要求之一,一般來講,平均粒徑為4μm左右的填料、內(nèi)徑為5mm左右的色譜柱,當(dāng)流動相流速為1-3mL/min時,要求輸液泵的最高工作壓力達到34.47-41.36Mpa(5000-6000psi);目前國際上商品液相色譜儀泵的最高工作壓力一般為41.36Mpa (5000psi)左右。但隨著填料粒徑的不斷減小,粒徑為1-2.5μm范圍的小粒徑無孔色譜填料的應(yīng)用推廣,流動相在色譜柱中的阻力會更大,所以,2004年國際上出現(xiàn)了超高壓液相色譜,要求輸液泵能夠耐更高的壓力。目前市場上已有達到68.94Mpa(10000psi)的高壓恒流泵(如:Altex 100A)。
(2)穩(wěn)定性好、脈動小
輸液高壓泵的穩(wěn)定性和脈動大小會直接影響液相色譜儀系統(tǒng)的穩(wěn)定性(漂移和重復(fù)性)、影響系統(tǒng)的噪聲、降低靈敏度,特別是HPLC系統(tǒng)采用電化學(xué)檢測器和示差等檢測器,或進行梯度分離時更加重要,因此目前國際上很多高壓泵的壓力脈動都可以控制在1%以內(nèi)。
(3) 流量連續(xù)可調(diào)、流量范圍寬
目前國際上液相色譜儀的高壓泵,大多數(shù)流動范圍可以達到0.001-10.0mL/min(制備色譜的流量更大,有時要求達到數(shù)千mL/min),可以同時滿足各種不同內(nèi)徑的色譜柱的分析工作要求。
(4) 流量重復(fù)性好
很多液相色譜儀的泵的流量重復(fù)性可以達到0.07%(RSD)。但是重復(fù)性與測試方法有關(guān),目前國際上一般采用兩種方法測試:一是重量法,收取泵的單位時間里的流出液,在天平上直接稱其重量,判斷重復(fù)性;二是保留時間法,根據(jù)保留時間的長短,來判斷流量的重復(fù)性。在HPLC的分析工作中,其定性分析一般是根據(jù)保留時間。高壓泵的重復(fù)性(RSD)是極其重要的指標(biāo)之一,也是影響液相色譜儀整機系統(tǒng)重復(fù)性的一項非常重要的性能技術(shù)指標(biāo)。
(5)死體積小
高壓泵的死體積會影響LC的分析精密度和準(zhǔn)確度,特別是影響梯度洗脫的效果,一般總是希望死體積越小越好。因為高壓泵的死體積小,有利于溶劑的快速置換,并且有利于把系統(tǒng)的氣泡及時排出。
(6) 流量準(zhǔn)確度高
LC高壓泵的流量準(zhǔn)確度很重要,直接影響分析測試數(shù)據(jù)的重復(fù)性(可靠性)。目前國內(nèi)外HPLC的泵流量重復(fù)性一般在1%左右(與測試方法有關(guān)),最好的可達到0.06%(采用保留時間法;如美國waters、日本島津、中國譜析通用的高壓泵等就是如此)。
(7) 具有梯度洗脫功能
目前國際上的液相色譜儀,一般都具有梯度洗脫功能;因為,往往等度洗脫不能解決的分析工作,如果采用梯度洗脫的方法,就可能很好的解決問題。因此,HPLC的使用者,往往需要儀器的高壓泵具有流速程序和梯度洗脫程序。
除上述幾點外,對液相色譜儀的高壓泵的要求還有耐用、流速可控程、具有壓力檢測保護功能、維修方便等。雖說不是所有的泵都要求具有上述要求,但是很多泵具有這些功能,一般都能滿足液相色譜分析工作的要求