色譜儀系統(tǒng)在藥物研發(fā)中具有舉足輕重的作用，色譜數(shù)據(jù)完整性和合規(guī)性直接決定藥品注冊成敗。本文是氣相色譜儀廠家山東譜析基于多年藥物分析經(jīng)驗對色譜數(shù)據(jù)完整性理論的簡淺總結(jié)，不妥之處，還望指正！
數(shù)據(jù)完整性是指數(shù)據(jù)和流程在其整個生命周期中的整體完整性、準(zhǔn)確性和一致性。
雖然這看起來很簡單，但真正以完整性和準(zhǔn)確性生成、維護和轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)的整個過程對于任何從事藥物制造者來說都是一項具有挑戰(zhàn)性的任務(wù)。而色譜數(shù)據(jù)完整性更是體現(xiàn)在色譜系統(tǒng)、對照品管理、樣品管理、原始記錄管理以及Excel驗證等方面。
色譜系統(tǒng)
色譜工作站
色譜工作站獲得的色譜數(shù)據(jù)應(yīng)當(dāng)可靠、安全、完整、可溯源。藥物制造者應(yīng)該選擇、安裝和使用適合其既定用途的色譜系統(tǒng)，并可以得到穩(wěn)定的售后服務(wù)。系統(tǒng)應(yīng)符合法規(guī)要求和GMP要求，包括但不僅限于，確保數(shù)據(jù)采集、處理和存貯符合國家法律和可追溯、清晰、同步、原始和準(zhǔn)確的原則。鼓勵采用經(jīng)規(guī)范和系統(tǒng)驗證的色譜工作站進行研究工作，但并不是說非要使用安捷倫系列、Empower、Solutions系列等軟件。不過國內(nèi)色譜工作站的靠譜性值得商榷。目前國內(nèi)大中型藥物制造從事者大部分已經(jīng)采用了本地?zé)o數(shù)據(jù)儲存的網(wǎng)絡(luò)版工作站，確保了數(shù)據(jù)的安全性、可靠性和完整性。
驗證與確認
色譜儀系統(tǒng)在進行藥物制造行為前需要按照經(jīng)過批準(zhǔn)的驗證方案進行驗證。色譜系統(tǒng)驗證和確認的范圍和程度應(yīng)根據(jù)風(fēng)險管理原則確定。驗證和確認應(yīng)在方案中進行說明，并記錄在報告中。報告中應(yīng)包括文件化證據(jù)，如截屏、打印輸出或其它作為驗證和確認的一部分所執(zhí)行檢測的源數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)應(yīng)提供證據(jù)證明系統(tǒng)性能一致性，以及結(jié)果可靠準(zhǔn)確。參數(shù)（例如但不僅限于密碼控制、審計追蹤、訪問和權(quán)限）應(yīng)在驗證和確認時說明并核對。如發(fā)現(xiàn)任何校正參數(shù)超出校準(zhǔn)范圍或不符合既定限度，則應(yīng)進行根本原因分析、影響性分析和風(fēng)險評估。應(yīng)采取適當(dāng)?shù)腃APA。
1）新購氣相色譜儀、液相色譜儀系統(tǒng)需要進行驗證，并組織好相關(guān)文件的撰寫和審評，下圖是相關(guān)文件梳理。
當(dāng)然上述所有行為均是由總驗證計劃所決定的，有些色譜實驗室還將操作確認和性能確認合并成OPQ或?qū)惭b確認和操作確認合并成IOQ，但一般不建議將三者合并形成IOPQ。具體詳見筆者撰寫的《色譜系統(tǒng)驗證和確認理論》。
2）舊色譜儀系統(tǒng)應(yīng)該約定周期性進行期間核查進行再確認，已確定系統(tǒng)是否滿足使用。每年需經(jīng)具有鑒定資格的鑒定機構(gòu)對儀器進行鑒定并出具合格證。
訪問與權(quán)限
1) Windows賬戶應(yīng)只有一個管理員賬戶，管理員賬戶僅限于系統(tǒng)維護使用。對于每個實驗人員應(yīng)該分別有自己獨立的賬戶和密碼，每個賬戶僅有寫入和讀取權(quán)限。所有賬戶應(yīng)該設(shè)置計算機屏幕保護，并在短時間內(nèi)自動鎖屏。即使管理員也不應(yīng)該具備刪除數(shù)據(jù)，更改系統(tǒng)時間的權(quán)限。
2）工作站應(yīng)有標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）規(guī)定色譜儀系統(tǒng)用戶組和用戶的創(chuàng)建與刪除，寫明為每個用戶所分配的權(quán)限。記錄應(yīng)保存。每個組內(nèi)的用戶應(yīng)有適當(dāng)資質(zhì)可承擔(dān)指定的職責(zé)和權(quán)限。用戶組、用戶及其權(quán)限的手工記錄應(yīng)與電子數(shù)據(jù)相一致。應(yīng)該建立一個關(guān)于密碼的SOP。工作站在無操作時應(yīng)短期內(nèi)鎖定。即使管理員也不應(yīng)該具備刪除數(shù)據(jù)的權(quán)限。
審計追蹤
以往我們使用的ChemStation、Solution等工作站并不具備審計追蹤功能，隨著藥物審查的日益嚴(yán)格，大部分色譜工作站廠家均升級了自己的工作站。目前國內(nèi)各大型藥企均已配備具備審計追蹤功能的色譜工作站。在色譜工作安裝開始即應(yīng)全面激活審計追蹤功能，并在色譜系統(tǒng)的生命周期中保持一致處于激活狀態(tài)。審計追蹤應(yīng)根據(jù)SOP進行審核。應(yīng)有證據(jù)證明對審計追蹤進行了日常（每次色譜分析）和定期審核。審計追蹤是元數(shù)據(jù)的一部分，應(yīng)作為所有色譜數(shù)據(jù)系列一并存貯。下表是筆者對色譜實驗室審計追蹤的基本要求做簡單總結(jié)概括：
簽名
目前可以校驗個人身份的方式主要有：手簽名、電子簽名、生物測定學(xué)以及數(shù)字簽名。其中電子簽名是色譜儀系統(tǒng)中常用的方式。電子簽名是指一種有一個人執(zhí)行、采用或批準(zhǔn)成為與其個人的手寫簽名具有相同的法律效力的計算機數(shù)據(jù)的任意符號或一系列符合的編譯。下表是電子簽名的一般要求
色譜柱
色譜柱是色譜系統(tǒng)中的核心部分，在進行藥物制造行為時應(yīng)選用合適的經(jīng)過批準(zhǔn)的供應(yīng)商提供的色譜柱，新收到色譜柱應(yīng)該進行驗收（包括柱效測試）并形成記錄歸檔。應(yīng)該建立色譜柱使用檔案（因至少包括使用時間區(qū)間、用途、使用狀況、最后封存液體等）。每次實驗應(yīng)該詳細記錄色譜柱信息。應(yīng)該按照經(jīng)批準(zhǔn)的色譜柱再生SOP進行再生。退役色譜柱應(yīng)該由相關(guān)的退役流程并貼標(biāo)識統(tǒng)一管理。
溶劑及流動相
溶劑、緩沖液和流動相制備、存貯和使用應(yīng)根據(jù)批準(zhǔn)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、程序和藥典。應(yīng)在其經(jīng)過驗證的有效期內(nèi)使用。詳細記錄配制過程并準(zhǔn)確記錄所用到化學(xué)品、試劑和其他物料的信息（至少包括廠牌、批號、級別等）。溶劑及流動相的使用應(yīng)該按照SOP操作。
色譜方法
1）采集方法
詳細記錄采集方法開發(fā)過程并且對確定的采集方法進行詳細的方法學(xué)驗證，這些工作應(yīng)由有資質(zhì)有經(jīng)驗的人員按要求進行。經(jīng)過方法學(xué)驗證后的采集方法應(yīng)盡可能由指定人員創(chuàng)建和保存在色譜系統(tǒng)中。采集方法不應(yīng)隨意進行修訂，如需修訂應(yīng)由授權(quán)人員根據(jù)其意向目的進行批準(zhǔn)，修改后重新進行方法學(xué)驗證才可以進行產(chǎn)生效力的樣品測定。應(yīng)規(guī)定樣品序列，對照液、樣品溶液和空白溶液進樣瓶應(yīng)進行核對以確保色譜系統(tǒng)進樣序列正確。
最好不要“試針”、“系統(tǒng)檢查進針”或其它未規(guī)定作為樣品序列一部分的進針。例外情形需要使用時，應(yīng)在批準(zhǔn)程序里清楚說明。但只有對照溶液可以用于此目的，樣品是絕對不能進行“試針”檢查的。最好記錄進樣前序列表和進樣后序列表，這樣可以對比進樣前后的實際情況，除非色譜工作站具有此功能。每個樣品序列表應(yīng)單獨跟蹤空白對照，可以監(jiān)測是否會產(chǎn)生干擾。應(yīng)該制定系統(tǒng)適用性的可接受范圍。
2）處理方法
所采集的結(jié)果應(yīng)使用經(jīng)過驗證的方法進行處理。所選方法應(yīng)可追溯，并反映在審計追蹤里。處理方法應(yīng)該符合可追溯、清晰、同步、原始和準(zhǔn)確的原則。處理方法應(yīng)該根據(jù)實際情況調(diào)整斜率靈敏度、噪聲閾值、峰寬、峰面積閾值和集束因子及撇去比率的參數(shù)。一般來說色譜峰準(zhǔn)確積分的必要條件是所有峰能完全分離。如果必須從未分開的峰中獲得定量數(shù)據(jù)，則實驗室應(yīng)制訂明確的方針說明如何對這些峰進行積分。其中應(yīng)包括闡明何時可使用不同函數(shù)對未分離的峰進行積分。
如撇去設(shè)置、通過設(shè)置峰谷比和峰高比來調(diào)整等。一般來說是不建議手動積分的，非要進行手動積分應(yīng)該按照建立的手動積分SOP進行并保存好記錄。自動積分和手動積分的譜圖必須同時保存。手動積分應(yīng)該按最差情況積分。積分過程中的平滑處理是要經(jīng)過論證處理的。色譜系統(tǒng)應(yīng)該獨立保存每次數(shù)據(jù)處理后的結(jié)果并且保證每次結(jié)果可讀。同一樣品序列應(yīng)該使用同一個處理方法。
數(shù)據(jù)管理
所有數(shù)據(jù)在災(zāi)難（如儀器故障、病毒、硬件或軟件故障和斷電）發(fā)生時可恢復(fù)。所獲取的色譜數(shù)據(jù)應(yīng)可追溯、清晰、原始和準(zhǔn)確。數(shù)據(jù)應(yīng)根據(jù)程序備份，記錄應(yīng)保存作為證據(jù)。應(yīng)特別注意確保單機系統(tǒng)數(shù)據(jù)備份要頻繁，以防止數(shù)據(jù)遺失。數(shù)據(jù)應(yīng)安全存貯，包括對數(shù)據(jù)訪問進行控制。備份數(shù)據(jù)應(yīng)按指定時間間隔隨機抽取進行恢復(fù)和驗證。完整數(shù)據(jù)應(yīng)保存適當(dāng)時長，期間可進行數(shù)據(jù)核查、注冊申報或其它。
對照品管理
對接收的對照品需進行驗收（對照品名稱、數(shù)量、有效期、供應(yīng)商、外觀狀態(tài)、純度復(fù)核及對照品證書），合格后進行登記入賬，并按說明書或指定的儲存條件嚴(yán)格儲存。一般按標(biāo)準(zhǔn)品的規(guī)定貯存期限執(zhí)行，沒有期限的原則上化學(xué)提純物標(biāo)準(zhǔn)品為3年（生物試劑和不穩(wěn)定的以6～12個月為宜）。對照品純度標(biāo)定在在驗收時一并進行。
實驗人員根據(jù)項目，領(lǐng)用對照品，對照品管理員根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品存放位置，尋找標(biāo)準(zhǔn)品交于實驗人員。實驗人員初步驗收對照品后，填寫領(lǐng)用記錄，記錄應(yīng)至少包括（對照品名稱、純度、廠家、規(guī)格、批號、領(lǐng)用時間、領(lǐng)用人、用途、領(lǐng)用前質(zhì)量和領(lǐng)用后質(zhì)量等信息）。對照品的第一個開封者，應(yīng)將對照品的開瓶日期、純度、有效期標(biāo)注于標(biāo)準(zhǔn)品瓶上，并簽名。色譜實驗室用到的所有對照品都應(yīng)該有合理的有效期，對照品的有效期應(yīng)基于廠家提供、歷史數(shù)據(jù)的總結(jié)或穩(wěn)定性研究的結(jié)果。對照品過期或出現(xiàn)異常無法使用時，應(yīng)提出銷毀申請，不能私自處理。
由對照品管理員記錄。記錄內(nèi)容至少包括品名、規(guī)格、數(shù)量、銷毀原因、購入單位、購入日期、申請人、批準(zhǔn)人。對照品溶液的配制過程應(yīng)該詳細記錄并標(biāo)注配置信息、儲存條件及有效期。所用官方、第二或工作對照品應(yīng)可通過保存的記錄追溯其采購、配制、存貯和使用情況。
樣品管理
樣品進入色譜儀實驗室應(yīng)該填寫樣品送檢單（送檢單應(yīng)至少記錄送檢樣品名稱、送檢數(shù)量、批號、送檢人、結(jié)構(gòu)式、儲存條件、外觀及簡單物理性質(zhì)等）。應(yīng)錄入適當(dāng)記錄，確保樣品詳細信息和分析可追溯。樣品也應(yīng)簡單記錄使用情況，例如使用前質(zhì)量、使用后質(zhì)量、使用日期、用途使用人等。
原始記錄管理
原始記錄管理見筆者撰寫的《依6M分析法形成的藥物科研實驗室中的原始記錄》及《藥物分析測定中修約規(guī)則理論》。在此不做贅述。
Excel驗證
色譜實驗中最常用的計算輔助工具就是Excel，Excel也是色譜數(shù)據(jù)完整性必不可少的條件，因此保證Excel數(shù)據(jù)的可追溯、清晰、原始和準(zhǔn)確是十分必要的。使用Excel計算一些關(guān)鍵數(shù)據(jù)（產(chǎn)品放行、關(guān)鍵控制指標(biāo)）前，需要對Excel進行驗證。對于色譜實驗室來說只需要驗證用Excel軟件創(chuàng)建的電子表格中的內(nèi)容。主要包括計算公式、數(shù)據(jù)引用、數(shù)據(jù)檢查、數(shù)據(jù)格式、數(shù)據(jù)精度等。具體驗證理論見筆者撰寫的《色譜實驗室中Excel數(shù)據(jù)可靠性驗證理論》。
結(jié)語
以上是氣相色譜儀廠家山東譜析根據(jù)多年經(jīng)驗并結(jié)合國外理論對色譜實驗室數(shù)據(jù)完整性相關(guān)要求的漫談。保證色譜實驗室的數(shù)據(jù)可追溯、清晰、原始和準(zhǔn)確是一項及其復(fù)雜繁重的工作。任何理論性指導(dǎo)原則僅是我們從事色譜行為的基本，只有在實驗中不斷積累經(jīng)驗，養(yǎng)成保證色譜數(shù)據(jù)完整性的習(xí)慣，才能真正做出可追溯、清晰、原始和準(zhǔn)確的色譜數(shù)據(jù)。更多儀器資訊可與公司在線客服聯(lián)系溝通，也可撥打24小時服務(wù)熱線13276328166 進行聯(lián)系。
