高效液相色譜儀(HPLC)現(xiàn)已成為有機化學(xué)分析的重要手段之一。同樣,在食品分析中,無論是殘留分析還是成分分析,液相色譜儀也已成為不可或缺的分析儀器。和其它分析儀器一樣,若想讓液相色譜儀很好地工作、得到可靠的數(shù)據(jù),首先要保養(yǎng)好它,使它處于一個良好的待機狀態(tài),這樣操作進(jìn)行分析時就可以比較順利地獲得理想的結(jié)果。而且良好規(guī)范的操作習(xí)慣可以延長儀器使用壽命。
大家在學(xué)校或接受儀器公司培訓(xùn)的時候,老師或工程師會提出很多的操作注意事項。但要是總結(jié)歸納一下,最重要的有三點:脫氣、過濾和沖洗。本文先介紹液相色譜儀操作重點”脫氣“
流動相脫氣是高效液相色譜儀提高檢測性能和保護(hù)色譜柱的有效措施。
一、高效液相色譜儀流動相脫氣的目的:
1、使色譜泵輸液均勻準(zhǔn)確,減小脈動。
2、提高保留時間和色譜峰面積的重現(xiàn)性。
3、防止氣泡引起尖峰。
4、使基線穩(wěn)定,提高信噪比。
5、降低溶劑的紫外吸收本底。
6、減少死體積。
7、防止填料氧化。
二、高效液相色譜儀流動相常用的脫氣方法:
1、吹氦脫氣法:
利用液體中氦氣的溶解度比空氣低的特性,連續(xù)吹氦脫氣,效果較好,適合所有溶劑。但成本高,使用較少。
2、加熱回留法:
脫氣效果比較好,但操作復(fù)雜。
3、超聲波脫氣法:
操作簡單,但脫氣效果不理想。
4、抽真空脫氣法:
利用真空泵降壓至0.05~0.07MPa,可除去溶劑中的氣體。但抽真空會引起混合溶劑組分的變化,從而影響實驗的重現(xiàn)性,多用于單一溶劑體系。
5、在線真空脫氣法:
利用膜滲透技術(shù),在線真空脫氣,智能控制,成本低,脫氣效果明顯優(yōu)于以上幾種方法,并適用于多元溶劑體系。