近日，藥監(jiān)局批準(zhǔn)發(fā)布3項(xiàng)補(bǔ)充檢驗(yàn)方法，分別為《根痛平片中松香酸檢查項(xiàng)補(bǔ)充檢驗(yàn)方法》《烏雞白鳳丸中擬人參皂苷F11檢查項(xiàng)補(bǔ)充檢驗(yàn)方法》和《消糜栓中擬人參皂苷F11檢查項(xiàng)補(bǔ)充檢驗(yàn)方法》，涉及高效液相色譜法和質(zhì)譜法。
根痛平片中松香酸檢查項(xiàng)補(bǔ)充檢驗(yàn)方法
(松香酸 高效液相色譜法(中國(guó)藥典2020年版通則0512)測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈‐0.1%甲酸(88∶12)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為241nm。理論板數(shù)按松香酸色譜峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
對(duì)照溶液的制備(臨用新制) 取松香酸對(duì)照試劑適量，精密稱定，加乙醇制成每1ml含10μg的溶液，作為對(duì)照試劑溶液。另取11-羰基-β-乙酰乳香酸對(duì)照品適量，精密稱定，加乙醇制成每1ml含4μg的溶液，作為參照溶液。
供試品溶液的制備 取本品10片，糖衣片除去包衣，研細(xì)，取0.2g，精密稱定，精密加入乙醇20ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。
測(cè)定法 分別精密吸取供試品溶液、對(duì)照試劑溶液與參照溶液各10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。
結(jié)果判斷 供試品色譜中，在與松香酸對(duì)照試劑溶液色譜峰保留時(shí)間相應(yīng)的位置不得出現(xiàn)相同的色譜峰。若出現(xiàn)保留時(shí)間相同的色譜峰，采用二極管陣列檢測(cè)器比較相應(yīng)色譜峰的紫外-可見(jiàn)吸收光譜，吸收光譜應(yīng)不同(松香酸對(duì)照試劑色譜峰在241nm顯示最大吸收)；若吸收光譜相同，且該色譜峰的峰面積值大于11-羰基-β-乙酰乳香酸參照溶液色譜峰的峰面積值，則視為陽(yáng)性檢出。
烏雞白鳳丸中擬人參皂苷F11檢查項(xiàng)補(bǔ)充檢驗(yàn)方法
【檢查】擬人參皂苷F11 照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2020年版通則0512)和質(zhì)譜法(中國(guó)藥典2020年版通則0431)測(cè)定。
色譜、質(zhì)譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(色譜柱內(nèi)徑2.1mm)；以乙腈為流動(dòng)相A，水為流動(dòng)相B，按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；流速為0.35ml/min；柱溫為40℃；采用質(zhì)譜檢測(cè)器，電噴霧負(fù)離子模式(ESI-)，進(jìn)行多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)，選擇質(zhì)荷比m/z799.6→653.6和m/z799.6→491.6作為檢測(cè)離子對(duì)。
對(duì)照品溶液的制備 取擬人參皂苷F11對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，精密量取適量，用20%乙腈稀釋制成每1ml含0.4ng的溶液，即得。
供試品溶液的制備 取本品水蜜丸，研細(xì)，取約1.5g；或取小蜜丸或大蜜丸，剪碎，取約2.25g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入80%甲醇25ml，密塞，稱定重量，置80℃水浴中加熱回流75分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用80%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液1ml，置100ml量瓶中，加20%乙腈稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5µl，注入高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，測(cè)定。
判定原則 (1)供試品的提取離子流色譜中，未同時(shí)出現(xiàn)與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，視為未檢出；(2)供試品的提取離子流色譜中，同時(shí)出現(xiàn)與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，且供試品色譜中m/z799.6→653.6的色譜峰面積值不大于對(duì)照品溶液中相應(yīng)的峰面積值者，視為未檢出；(3)供試品的提取離子流色譜中，同時(shí)出現(xiàn)與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，且供試品色譜中m/z799.6→653.6的色譜峰面積值大于對(duì)照品溶液中相應(yīng)的峰面積值者，視為檢出。
消糜栓中擬人參皂苷F11檢查項(xiàng)補(bǔ)充檢驗(yàn)方法
【檢查】擬人參皂苷F11 照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2020年版通則0512)和質(zhì)譜法(中國(guó)藥典2020年版通則0431)測(cè)定。
色譜、質(zhì)譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(色譜柱內(nèi)徑2.1mm)；以乙腈為流動(dòng)相A，水為流動(dòng)相B，按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；流速為0.35ml/min；柱溫為40℃；采用質(zhì)譜檢測(cè)器，電噴霧負(fù)離子模式(ESI-)，進(jìn)行多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)，選擇質(zhì)荷比m/z799.6→653.6和m/z799.6→491.6作為檢測(cè)離子對(duì)。
對(duì)照品溶液的制備 取擬人參皂苷F11對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，精密量取適量，用20%乙腈稀釋制成每1ml含4ng的溶液，即得。
供試品溶液的制備 取本品10粒，剪碎，取約3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入80%甲醇25ml，密塞，稱定重量，置80℃水浴中加熱回流75分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用80%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液1ml，置100ml量瓶中，加20%乙腈稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5µl，注入高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，測(cè)定，記錄色譜圖。
判定原則 (1)供試品的提取離子流色譜中，未同時(shí)出現(xiàn)與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，視為未檢出；(2)供試品的提取離子流色譜中，同時(shí)出現(xiàn)與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，且供試品色譜中m/z 799.6→653.6的色譜峰面積值不大于對(duì)照品溶液中相應(yīng)的峰面積值者，視為未檢出；(3)供試品的提取離子流色譜中，同時(shí)出現(xiàn)與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，且供試品色譜中m/z 799.6→653.6的色譜峰面積值大于對(duì)照品溶液中相應(yīng)的峰面積值者，視為檢出。
