抗氧化劑是指能防止或延緩食品氧化，提高食品的穩(wěn)定性和延長貯存期的食品添加劑。GB5009.32-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中9種抗氧化劑的測定》中采用GPC和C18小柱對食品中9種抗氧化劑進(jìn)行前處理，該方法回收率低，測試結(jié)果不穩(wěn)定。山東譜析公司優(yōu)化了實驗方法，用CNW Poly-Sery PSD SPE小柱進(jìn)行前處理，克服了國標(biāo)方法的缺點(diǎn)，方法簡單，9種抗氧化劑的回收率均在90%以上。
一、樣品前處理
1、植物油基質(zhì)：準(zhǔn)確稱取混合均勻的試樣1g（極ng確至0.01 g）于50mL離心管中，加入3mL乙腈飽和的正己烷溶液溶解樣品，渦旋1min，靜置10min，用3mL含AP的正己烷飽和的乙腈溶液渦旋提取2min，3000r/min離心5min，收集乙腈層于另一50mL離心管中，再重復(fù)使用3mL含AP的正己烷飽和的乙腈溶液溶液提取4次，合并5次提取液，待上樣。（提取次數(shù)對BHT的回收率影響很大）
含AP的正己烷飽和的乙腈溶液：1L正己烷飽和的乙腈中溶解0.1gL-抗壞血酸棕櫚酸酯（AP)
2、植物油基質(zhì)加標(biāo)：在樣品中加入標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000ppm，100ul，使上機(jī)檢測濃度為50ppm），其它操作同樣品空白。
二、小柱操作
SBEQ-CA3554 CNW Poly-Sery PSD SPE小柱 500mg/6ml
小柱上端預(yù)裝2g 無水硫酸鈉
活化：5ml甲醇
平衡：5ml乙腈
上樣：全部待凈化液
洗脫：15ml乙腈：甲醇（2:1）
氮吹濃縮：全部上樣液和洗脫液一起收集濃縮，在40℃下旋蒸至1ml左右，轉(zhuǎn)移至15mL離心管中，用少量乙腈潤洗旋蒸瓶3次，合并后40℃氮吹至0.5mL，用乙腈定至2mL，渦旋30s，過0.22um PVDF或PTFE濾頭后，用高效液相色譜儀配二極管陣列檢測器測定。
三、儀器測定條件
儀器：LC-5000（DAD）
色譜柱：C18（4.6*100mm*2.6um）
流動相梯度：
流速：1.0mL/min
柱溫：35 ℃
進(jìn)樣量：5μL
檢測器波長：280nm
液相色譜法具有高柱效、高選擇性、高分辨度、快速分離的特點(diǎn)，且其樣品和試劑消耗少。因此，此方法可以很好的實現(xiàn)9種抗氧化劑含量的檢測。
