制備型高效液相色譜儀通常都被認為和大容量色譜柱和高流速有關聯(lián)的。然而并不是以設備的大小和系統(tǒng)消耗的流動相的多少來決定制備高效液相色譜,而是依據(jù)分離目的來決定。分析液相的目的是給一種組份進行定量和定性。制備液相的目的是對產(chǎn)品的單體進行提取和純化。與傳統(tǒng)的純化方法(如蒸餾、萃?。┍容^,制備液相是一種更有效的分離方法,因此被廣泛應用在樣品和產(chǎn)品的提取和純化上。隨著合成、植化、生化和制藥等領域對高純度組份的需求不斷增加,制備型液相色譜儀應用的領域也在迅速的擴大發(fā)展
高效液相色譜(HPLC)是近30年發(fā)展起來的一種具有高靈敏度、高選擇性的高效快速分離分析技術。它既能用于微量組分的分析測定,又能用于大量的制備分離,靈活多樣,其應用范圍已超過其他各種分離方法,尤其在中藥樣品的分析分離方面更充分發(fā)揮它的特長,為推動該領域的進步和發(fā)展作出了巨大貢獻。
根據(jù)用途和泵配置的不同,一般可以將常見的實驗室級別LC分為以下幾種:分析型高效液相色譜儀(HPLC),半制備液相色譜儀(Semi-Prep HPLC)和制備型高效液相色譜儀(Prep-HPLC)以及中壓液相色譜儀(MPLC)。這三者的原理基本一樣,不同之處主要在于泵的最大流速,一般而言,分析型HPLC的最大流速為10.00mL/min,半制備HPLC為50mL/min,制備HPLC為100mL/min,中壓液相色譜更高。而由于泵流速的升高,流通池的光程、體積,管道的內徑,六通閥、定量環(huán)等零件也會相應改變;并且,根據(jù)實驗室的需要,可以增加自動接收器等配件。
我們了解了液相色譜儀和制備型液相色譜儀的不同點,那么問題來了,制備型高效液相色譜儀在什么領域里最常用?
目前,實驗室級別的制備液相色譜主要用于以下領域:
1.天然藥物化學、中藥化學。這是國內目前最廣泛的使用方法,為了弄清楚植物中的微量有效成分,開放手工色譜柱早已不夠用了,幾乎每個搞天然藥化的實驗室都至少有一臺液相,土豪實驗室人手一臺液相。
2.蛋白純化。相對于前者,蛋白純化的起步要稍微晚一點,但是發(fā)展很迅速。同時,由于外國儀器廠家在這個領域的優(yōu)勢不算太大,目前國內也在這個領域加快發(fā)展,搶占地盤。
3.藥物雜質純化。由于合成工藝并不能做到100%的產(chǎn)率,往往伴有副產(chǎn)品,如何獲得微量的雜質并確定結構和含量,這就得靠液相色譜。
4.手性化合物的制備。這個主要是有機合成和方法學的在用。
總之,目前有機化學領域里,開放手工柱層析依然是最常用的分離手段,也是每個有機狗必會的技能之一,其在未來很長一段時間里將仍然扮演重要的角色。制備液相已經(jīng)在天然藥化領域大面積使用,在將來,隨著科研的需要和價格的下降,將會逐漸進入千家。