氣相色譜儀和液相色譜儀是有機(jī)檢測(cè)的兩大基本儀器,占據(jù)著有機(jī)實(shí)驗(yàn)室的統(tǒng)治地位,雖然同做有機(jī)檢測(cè),但就兩個(gè)儀器本身也有著較大區(qū)別,譜析色譜小編從以下5個(gè)方面進(jìn)行了比較。
氣相色譜是二十世紀(jì)五十年代出現(xiàn)的一項(xiàng)重大科學(xué)技術(shù)成就。這是一種新的分離、分析技術(shù),它在工業(yè)、農(nóng)業(yè)、國(guó)防、建設(shè)、科學(xué)研究中都得到了廣泛應(yīng)用。同為色譜技術(shù)之一,液相色譜也是一種分離與分析技術(shù),它的特點(diǎn)是以液體作為流動(dòng)相,固定相可以有多種形式,如紙、薄板和填充床等。那么,氣相色譜和液相色譜相比各有什么特點(diǎn)呢?可以從以下幾個(gè)方面進(jìn)行比較:
流動(dòng)相
氣相色譜儀用氣體作流動(dòng)相,又叫載氣。常用的載氣有氦氣、氮?dú)夂蜌錃?。與HPLC相比,GC流動(dòng)相的種類(lèi)少,可選擇范圍小,載氣的主要作用是將樣品帶入GC系統(tǒng)進(jìn)行分離,其本身對(duì)分離結(jié)果的影響很有限。
而在液相色譜儀中,流動(dòng)相種類(lèi)多,且對(duì)分離結(jié)果的貢獻(xiàn)很大。換一個(gè)角度看,GC的操作參數(shù)優(yōu)化相對(duì)HPLC要簡(jiǎn)單一些。此外,GC載氣的成本要低于HPLC流動(dòng)相的成本。
固定相
因?yàn)镚C的載氣種類(lèi)相對(duì)少,故其分離選擇性主要通過(guò)不同的固定相來(lái)改變,尤其在填充柱GC中,固定相常由載體和涂敷在其表面的固定液組成,這對(duì)分離有決定性的影響,所以,導(dǎo)致了種類(lèi)繁多的GC固定相的開(kāi)發(fā)研究。迄今已有數(shù)百種GC固定相可供我們選擇使用,但常用的HPLC固定相也就十幾種。
故LC在很大程度上要靠選用不同的流動(dòng)相來(lái)改變分離選擇性。當(dāng)然,毛細(xì)管GC常用的固定相也不過(guò)十幾種。在實(shí)際分析中,GC一般是選用一種載氣,然后通過(guò)改變色譜柱(即固定相)以及操作參數(shù)(柱溫和載氣流速等)來(lái)優(yōu)化分離,而LC則往往是選定色譜柱后,通過(guò)改變流動(dòng)相的種類(lèi)和組成以及操作參數(shù)(柱溫和流動(dòng)相流速等)來(lái)優(yōu)化分離。
分析對(duì)象
GC所能直接分離的樣品是可揮發(fā)、且熱穩(wěn)定的,沸點(diǎn)一般不超過(guò)500℃。據(jù)有關(guān)資料統(tǒng)計(jì),在目前已知的化合物中,有20%~25%可用GC直接分析,其余原則上均可用LC分析。也就是說(shuō)GC的分析對(duì)象遠(yuǎn)沒(méi)有LC多。
需要指出的是,有些雖然不能用GC直接分析的樣品,通過(guò)特殊的進(jìn)樣技術(shù),如頂空進(jìn)樣和裂解進(jìn)樣,也可用GC間接分析。比如高分子材料的裂解色譜就是如此。這在一定程度上擴(kuò)大了GC分析對(duì)象的范圍。此外,GC比LC更適合于氣體的分析。
檢測(cè)技術(shù)
GC常用的檢測(cè)技術(shù)有多種,比如熱導(dǎo)檢測(cè)器(TCD)、火焰離子化檢測(cè)器(FID)、電子俘獲檢測(cè)器(ECD)、氮磷檢測(cè)器(NPD)等,其中FID對(duì)大部分有機(jī)化合物均有響應(yīng),且靈敏度相當(dāng)高,最小檢測(cè)限可達(dá)納克級(jí)。
而在LC中尚無(wú)通用性這么好的高靈敏度檢測(cè)器。商品LC儀器常配的也就是紫外-可見(jiàn)光吸收檢測(cè)器(UV-Vis)和示差折光檢測(cè)器(RI)。前者的通用性遠(yuǎn)不及GC中的FID,后者的靈敏度又較低,且不適于梯度洗脫。當(dāng)然,不論GC還是LC,都有一些高靈敏度的選擇性檢測(cè)器,GC有ECD和NPD等,LC有熒光和電化學(xué)檢測(cè)器。較為理想的檢測(cè)器應(yīng)該首推MS,但在這一點(diǎn)上,GC目前要優(yōu)于LC。
因?yàn)镚C流動(dòng)相的特點(diǎn),它與MS的在線(xiàn)聯(lián)用已不存在任何問(wèn)題,特別是毛細(xì)管GC與MS的聯(lián)用已成為常規(guī)分析方法。而LC與MS的聯(lián)用就受到了流動(dòng)相的限制。雖然目前已有多種接口,如離子束、熱噴霧、電噴霧等,但流動(dòng)相的選擇還是受到明顯的限制。
制備分離
在新產(chǎn)品的研究開(kāi)發(fā)過(guò)程中,或在未知物的定性鑒定工作中,常需要收集色譜分離后的組分作進(jìn)一步分析,而某些高純度的生化試劑則是直接用色譜分離來(lái)制備的。就這一點(diǎn)而言,GC在原理上應(yīng)該是有優(yōu)勢(shì)的,因?yàn)槭占s分后載氣很容易除去。然而,由于GC的柱容量遠(yuǎn)不及LC,如果用GC作制備,那是相當(dāng)費(fèi)時(shí)的。因此,制備GC的實(shí)用價(jià)值很有限。制備LC則有很廣泛的應(yīng)用。
下面就來(lái)介紹一下,相比于氣相色譜,液相色譜在以下三大方面所具備的優(yōu)越性。
1.氣相色譜不適用于不揮發(fā)物質(zhì)和對(duì)熱不穩(wěn)定物質(zhì),而液相色譜卻不受樣品的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制。有些樣品因?yàn)殡y以汽化而不能通過(guò)柱子,熱不穩(wěn)定的物質(zhì)受熱會(huì)發(fā)生分解,也不適用于氣相色譜法。這使氣相色譜法的使用范圍受到了限制。
2.對(duì)于很難分離的樣品,用液相色譜常比用氣相色譜容易完成分離,主要有以下三個(gè)方面的原因:
①液相色譜中,由于流動(dòng)相也影響分離過(guò)程,這就對(duì)分離的控制和改善提供了額外的因素。而氣相色譜中的載氣一般不影響分配,也就是說(shuō),在液相色譜中,有兩個(gè)相與樣品分子發(fā)生選擇性的相互作用。
②液相色譜中具有獨(dú)特效能的柱填料(固定相)的種類(lèi)較多,這樣就使固定相的選擇余地更大,從而增加了分離的可能性。
③液相色譜使用較低的分離溫度,分子間的相互作用在低溫時(shí)更為有效,因此降低溫度一般會(huì)提高色譜分離效率。
3.和氣相色譜相比,液相色譜對(duì)樣品的回收比較容易,而且是定量的,樣品的各個(gè)組分很容易被分離出來(lái)。因此,在很多場(chǎng)合,液相色譜不僅作為一種分析方法,而且可以作為一種分離手段,用以提純和制備具有中等純度的單一物質(zhì)。
綜上所述,與氣相色譜相比,液相色譜在樣品的適用性、分離能力以及樣品回收方面都具備著一定的優(yōu)越性。憑借著技術(shù)上的這些優(yōu)勢(shì),液相色譜得以在更多領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。
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