液相色譜儀安裝條件注意事項(xiàng)
安裝液相色譜儀的實(shí)驗(yàn)臺(tái)應(yīng)水平、穩(wěn)固、并具有足夠的放置空間。避免在具有腐蝕性氣體、大量灰塵或能產(chǎn)生強(qiáng)磁場(chǎng)的地方安裝本儀器,否則將會(huì)影響儀器的正常運(yùn)轉(zhuǎn)及縮短儀器的使用壽命。
由于液相色譜儀所用溶劑是易燃并且有毒,故安裝設(shè)備的房間應(yīng)通風(fēng)良好,應(yīng)具有向外排風(fēng)的裝置,否則可能會(huì)引起中毒或身體不適,也可能會(huì)引起火災(zāi)。
應(yīng)安裝四個(gè)以上三芯電源插座(220V,5~10A),**具有專門的接地線(注意,絕不能將電源線的中線作為接地線),并確保輸出電源的電壓穩(wěn)定,否則會(huì)導(dǎo)致儀器的不正常運(yùn)作。
如果實(shí)驗(yàn)室無專用的接地線,一般可用Φ15~20mm的銅棒打入地下1~1.5米,用Φ1.2mm左右的塑膠單股導(dǎo)線連接到電源插座的接地端。
如果實(shí)驗(yàn)室電壓不穩(wěn)定,應(yīng)使用穩(wěn)壓器等必要設(shè)備,使電源電壓穩(wěn)定。
實(shí)驗(yàn)室的室溫應(yīng)控制在15℃-30℃范圍內(nèi),并且波動(dòng)要??;濕度在45~85%范圍內(nèi)。
由空調(diào)或其他設(shè)備產(chǎn)生的氣流不要直吹儀器,避免光線直射及振動(dòng)。
液相色譜儀的啟動(dòng)順序:先開高壓恒流泵和紫外檢測(cè)器,待紫外檢測(cè)器自檢完畢,回到默認(rèn)波長(zhǎng)254nm后,再開計(jì)算機(jī)及打開工作站軟件。
液相色譜儀關(guān)閉順序:先按泵停止,關(guān)閉氘燈,退出工作站軟件,然后再關(guān)儀器。
液相色譜儀應(yīng)由專人負(fù)責(zé),如果使用人員不固定,請(qǐng)準(zhǔn)備《儀器使用登記本》,以明確使用情況,及時(shí)處理和保養(yǎng)。
流動(dòng)相使用的注意事項(xiàng)
液相色譜儀**使用HPLC級(jí)或相當(dāng)于該級(jí)別的流動(dòng)相,并要先經(jīng)0.45μm薄膜過濾。
過濾后的流動(dòng)相**經(jīng)過充分脫氣,以除去其中溶解的氣體(如O2),如不脫氣易產(chǎn)生氣泡,增加基線噪聲,造成靈敏度下降,甚至無法分析。
幾中脫氣方法比較:
1. 氦氣脫氣法:利用液體中氦氣的溶解度比空氣低,連續(xù)吹氦脫氣,效果較好,但成本高。
2. 加熱回流法:效果較好,但操作復(fù)雜,且有毒性揮發(fā)污染。
3. 抽真空脫氣法:易抽走有機(jī)相
4. 超聲脫氣法:一種較為常見的脫氣法。流動(dòng)相放在超聲波容器中,用超聲波震蕩10~15分鐘,此法效果并不是太好,但操作簡(jiǎn)單。
如果管路中使用peek樹脂部件,請(qǐng)不要使用下列流動(dòng)相:
濃硫酸、濃硝酸、二氯乙酸、丙酮、四氫呋喃、二氯甲烷、氯仿和二甲基亞砜
特別注意
含有緩沖鹽溶液的流動(dòng)相的清洗方法:
1. 先用10︰90的甲醇/水沖洗,以洗去緩沖鹽,清洗時(shí)間至少為一小時(shí)。
2. 再用70︰30的甲醇/水沖洗系統(tǒng),清洗時(shí)間至少為40分鐘。
3.將系統(tǒng)保存在純甲醇中。
流動(dòng)相的更換
在分析過程中,有時(shí)需要更換流動(dòng)相進(jìn)行分析。一定要注意前一種使用的流動(dòng)相和所更換的流動(dòng)相是不是能夠相溶。如果前一種使用的流動(dòng)相和所更換的流動(dòng)相不能夠相溶,那您就要特別注意了。要采用一種與這二種需更換的流動(dòng)相都能夠相溶的流動(dòng)相進(jìn)行過渡、清洗。較為常用的過渡流動(dòng)相為異丙醇,但實(shí)際操作中要看具體情況而定,原則就是采用與這二種需更換的流動(dòng)相都能夠相溶的流動(dòng)相。一般清洗的時(shí)間為30~40分鐘,直至系統(tǒng)完全穩(wěn)定。
如不進(jìn)行以上“特別注意”上述步驟的操作,將會(huì)導(dǎo)致系統(tǒng)管路堵塞。嚴(yán)重時(shí)將引起流通池污染堵塞,不得不更換流通池。用戶就要承擔(dān)不必要的損失了。
儲(chǔ)液器的注意事項(xiàng)
保持流動(dòng)相儲(chǔ)液器的清潔是保證液相色譜儀正常使用的關(guān)鍵。要使用HPLC級(jí)的溶劑,對(duì)試劑含有緩沖鹽及非HPLC級(jí)的流動(dòng)相一定要用0.45μm過濾器除去其中的微粒物質(zhì)。