藥物分析學(xué)是一門研究藥品及各種制劑的組成、理化性質(zhì)、真?zhèn)舞b別、純度檢查及其有效成分的含量測(cè)定等的一門學(xué)科。
對(duì)于藥物分析者來(lái)說(shuō)，掌握一定的方法技巧是必不可少的，但往往在分析過(guò)程中一些細(xì)節(jié)掌握不準(zhǔn)確，以至于整個(gè)分析結(jié)果的不理想，為此，譜析儀器小編總結(jié)一些藥物分析中的小技巧，方便大家查閱。
1、在用氣相色譜儀做醫(yī)療器械中環(huán)氧乙烷殘留檢測(cè)時(shí)顯色反應(yīng)應(yīng)在暗室存放。
2、中藥液相色譜儀測(cè)含量時(shí)，因每次配制的流動(dòng)相有差異，按標(biāo)準(zhǔn)配制的流動(dòng)相，有時(shí)峰分不開(kāi)，可以適當(dāng)調(diào)整比例，改善效果。
3、在藥材薄層色譜儀鑒別時(shí)應(yīng)該考慮一下展開(kāi)劑的溫度與配制順序，有時(shí)會(huì)影響色譜的結(jié)果。
4、做原料殘留物檢測(cè)的時(shí)候，如果主藥對(duì)雜質(zhì)有干擾，現(xiàn)有方法無(wú)法檢出，需要自己建方法的話，要優(yōu)先考慮利用理化性質(zhì)將雜質(zhì)分離出來(lái)再進(jìn)行測(cè)定。往往有意想不到的效果。
5、氣相色譜儀做藥品有機(jī)溶劑殘留量檢查時(shí)，可以不拘泥于規(guī)定的色譜柱，通常的DB-624可以滿足要求，取樣量也可以靈活調(diào)整，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度根據(jù)限度做相應(yīng)調(diào)整就可以了。
6、在采用HPLC法測(cè)物質(zhì)含量時(shí)，如若流動(dòng)相中用了緩沖鹽，一定要注意其PH值，放置過(guò)程中可能會(huì)產(chǎn)生變化，而某些藥物對(duì)這種變化很敏感。
7、在溫度低的環(huán)境下做一些中藥制劑的萃取時(shí)，往往會(huì)出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，即兩相不容易分層，這時(shí)可加入少量的飽和氯化鈉溶液或者用電吹風(fēng)對(duì)分液漏斗加溫或用熱抹布敷，可以加速其分層。
8、作中藥檳榔的薄層色譜儀鑒別時(shí)，用濃氨試液調(diào)PH一定要準(zhǔn)確，否則無(wú)斑點(diǎn)出現(xiàn)。
9、中藥制劑的溶液(比較稠或量少)要用濾紙過(guò)濾時(shí)，可以先通過(guò)離心的方法使之分層，再去過(guò)濾。這樣可以加快過(guò)濾，減少有機(jī)溶劑的揮發(fā)(環(huán)境溫度高時(shí))。
10、用高效液相色譜儀檢測(cè)人參、麻黃的含量時(shí)因檢測(cè)波長(zhǎng)為邊緣波長(zhǎng)(203、207nm)往往一次不能成功，特別是使用一段時(shí)間后的檢測(cè)器。可卸掉色譜柱，直接連接檢測(cè)器，用0.1%的鹽酸清洗檢測(cè)池4小時(shí)，效果會(huì)好些。
11、在做不溶性微粒的時(shí)候是可以進(jìn)行超聲的，藥典也有要求，可以進(jìn)行30秒的超聲。特別是象凍干粉針這樣的品種，進(jìn)行超聲或者放置可以使不溶性微粒的數(shù)值減小，大家可以實(shí)驗(yàn)一下，放置后數(shù)據(jù)明顯降低。
12、當(dāng)做高效液相測(cè)定肽類時(shí)，使用梯度條件情況下，在做第一針樣品前，最好走一個(gè)空梯度，這樣保留時(shí)間會(huì)一致些。
13、分析鹽酸金剛烷胺片含量時(shí)，加溶劑后最好在50℃的水浴中加熱溶解，因?yàn)榻饎偼榘啡芙舛仁軠囟扔绊憽?/span>
14、檢測(cè)紅景天苷時(shí)，溫浸2h的樣品含量比超聲30min的樣品含量高，雖然雜峰較多，保留溫浸法檢測(cè)比較準(zhǔn)確。
15、做油性基質(zhì)提取時(shí)，由于受溫度影響嚴(yán)重，常出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，分層時(shí)間長(zhǎng)，可上離心機(jī)只要幾分鐘。
16、做片劑的溶出度試驗(yàn)時(shí)(如紅霉素、阿齊等)用硫酸一定要臨用新配，否則硫酸吸水后會(huì)使結(jié)果偏低。
17、中藥做薄層鑒別時(shí)，需要檢測(cè)的主要成分，其性質(zhì)應(yīng)該與提取方法、展開(kāi)劑極性、顯色條件相適應(yīng)。
比如生物堿類成分，多顯堿性，因此提取方法多為堿性氯仿回流，展開(kāi)劑中肯定有濃氨或二乙胺，顯色用碘化鉍鉀試液。
再如黃酮類，不論是黃酮苷還是苷元，分子結(jié)構(gòu)中都有酚羥基而顯酸性，所以提取方法多為用乙酸乙酯在酸水中萃取，展開(kāi)劑多用甲苯-乙酸乙酯-甲酸系列，顯色劑5%三氯化鋁乙醇溶液或1%三氯化鐵乙醇溶液。
另外，做薄層時(shí)，建議用甲醇處理一份供試品溶液備用，他的內(nèi)容囊括了你需要檢驗(yàn)的所有成分，如果某個(gè)薄層你做不出來(lái)，就可以用這份供試品溶液復(fù)核，如果有斑點(diǎn)，改進(jìn)一下你的制備方法就可以了；如果還沒(méi)有，就考慮是你樣品的問(wèn)題了。
18、非水滴定中，試劑的含水量對(duì)結(jié)果有較大影響，如更換不同廠家的冰醋酸，試驗(yàn)結(jié)果會(huì)出現(xiàn)不同結(jié)果。
19、看到美國(guó)藥典的對(duì)照品干燥通常規(guī)定具體時(shí)間3到5小時(shí)，我們也應(yīng)該采用這種方法而不是干燥到恒重。
20、骨碎補(bǔ)原藥材檢驗(yàn)含量一般都合格，但提取后一般都不合格，是因?yàn)樘崛〉姆椒ú粚?duì)。記得一個(gè)朋友好像說(shuō)是應(yīng)該用沙熱炒。
21、樣品為西林瓶裝的粉針劑在做無(wú)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，往往由于壓力很難吸出來(lái)，但在加入無(wú)菌注射用水之前，先用無(wú)菌注射器推入少許空氣，再加注射用水，就很容易用無(wú)菌注射器將樣品溶液吸出來(lái)。
22、做紅霉素片釋放度時(shí)，酸度對(duì)釋放度的影響不小，能差5～7個(gè)百分點(diǎn)，要及時(shí)更換硫酸，否則可能會(huì)影響釋放度結(jié)果。
23、做格列吡嗪片含量時(shí)對(duì)照品不容易溶解，可在溶劑里面少加一點(diǎn)0.1mol的氫氧化鈉溶液使對(duì)照品溶解后再定溶。
24、做阿奇霉素片的溶出度時(shí)，用硫酸溶液(75–100)顯色時(shí)，所用的硫酸濃度一定要夠，最好用新開(kāi)瓶的，顯完色后應(yīng)是金黃色的，否則可能是淡黃色的。測(cè)得的結(jié)果也低。
25、在做中藥材的浸出物的檢測(cè)時(shí)，藥材的顆粒大小要過(guò)篩，過(guò)大的塊狀影響浸出效果。
26、鋪聚酰胺板時(shí)其中粘合劑宜選用可溶性淀粉，可溶性淀粉先溶于熱水中，晾涼后加入聚酰胺粉研磨就OK了。鋪出來(lái)的板子沒(méi)什么裂紋。聚酰胺粉大概0.7克左右，加可溶性淀粉0.3克左右溶于10毫升左右的水中。
27、做紅氧化鐵含量測(cè)定時(shí)一定要用鹽酸煮沸幾分鐘，不能因?yàn)槲ｋU(xiǎn)而隨便在水浴上加熱，這樣會(huì)使含測(cè)結(jié)果超過(guò)100%。
28、測(cè)定各種中藥材或中成藥含量測(cè)定時(shí)，配制的對(duì)照品前對(duì)照品除特殊規(guī)定外，一般要在五氧化二磷減壓干燥12小時(shí)以上。
29、做八角楓藥材鑒別時(shí)如果最后不顯斑點(diǎn)，一般是在分層的時(shí)候靜置時(shí)間不夠引起的。
30、采用蒽酮法測(cè)核糖含量時(shí)，蒽酮要現(xiàn)用現(xiàn)配，棕色瓶裝，稀釋硫酸應(yīng)于30-40度時(shí)加入蒽酮液中混勻。標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖于60度干燥2小時(shí)配制。
31、中藥注射劑檢驗(yàn)樹(shù)脂項(xiàng)時(shí)，用的氯仿最好用優(yōu)級(jí)的，不同的試劑對(duì)結(jié)果影響很大，同時(shí)在提取放置的時(shí)間盡量長(zhǎng)些，使其完全分開(kāi)。
32、說(shuō)一下做抗生素的一點(diǎn)體會(huì)，有時(shí)市售的培養(yǎng)基瓊脂量加的不一樣，一般是加多了，會(huì)導(dǎo)致藥液到了培養(yǎng)時(shí)間不能下完，可以在配制時(shí)適當(dāng)多加一點(diǎn)水，另外培養(yǎng)基的PH值對(duì)抑菌圈的影響很大，一定要測(cè)一下PH值。
33、做抗生素加藥時(shí)采用的毛細(xì)滴管尖頭容易碰斷，采用卡介苗注射器去掉玻璃塞，把后面的手柄部分用銼刀去掉在酒精噴燈上圓口，做一個(gè)喇叭口，前面買7號(hào)平頭針頭或者把7號(hào)針頭銼平，用著很方便，并且加液比原來(lái)更能準(zhǔn)確把握。
34、在用高氯酸滴定藥品含量的時(shí)候，如果實(shí)驗(yàn)室條件有限，實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境溫度與滴定液的標(biāo)定時(shí)的溫度相差較大的時(shí)候，可以用電爐在通風(fēng)櫥旁邊的地上加熱，這樣可以適當(dāng)提高實(shí)驗(yàn)的環(huán)境溫度，而又不會(huì)使溫度過(guò)高，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加精確。
35、有些對(duì)照品溶解性很低，配制時(shí)最好不要采用稀釋法，而要采用一次配制法并且最好加熱或者超聲處理，例如槐角堿、橙皮苷等。
36、用氨試液萃取水飽和正丁醇提取的三七類皂苷類成分時(shí)極易乳化，可在50度左右加熱促進(jìn)分層，效果非常好。
37、按照藥典標(biāo)準(zhǔn)在進(jìn)行氫氧化鈉的鋁鹽與鐵鹽的檢查時(shí)，濾渣用水洗凈這一步非常重要，如清洗不干凈容易造成結(jié)果超標(biāo)。建議用硝酸銀溶液測(cè)定以下流出液的氯離子濃度，判斷濾渣是否洗凈。
38、按照藥典方法檢驗(yàn)鹽酸麻黃堿鑒別時(shí)，使用無(wú)水乙醚不能鑒別顯色不明顯，將無(wú)水乙醚用水飽和后可解決。
39、做vc銀翹片含量，千萬(wàn)不要用超聲溶解，否者后面超級(jí)難過(guò)濾!直接振搖溶解就好!
40、檢驗(yàn)三黃片時(shí)，檢查項(xiàng)下鹽酸巴馬汀檢查，用制備檢驗(yàn)小檗堿的供試品與鹽酸巴馬汀對(duì)照品同點(diǎn)在硅膠G板上。檢查鹽酸巴馬汀是否超標(biāo)。
41、檢驗(yàn)阿莫西林膠囊含量時(shí)，溶解一定要充分，最好溶劑量要200ml以上，超聲溶解，否則側(cè)的含量偏低，甚至不合格。
42、做桿菌肽鋅薄層層析，得不到很好的結(jié)果，有拖尾現(xiàn)象。后來(lái)發(fā)現(xiàn)，如果展開(kāi)試劑良好的前提下，薄層層析與環(huán)境溫度，缸子蒸汽飽和，點(diǎn)樣技術(shù)非常有關(guān)系。缸子點(diǎn)樣前在展開(kāi)劑下飽和1小時(shí)在低溫最好在空調(diào)間(23±2℃)中，點(diǎn)樣2-4mm，不將扳子點(diǎn)破，這些條件控制很好，那么層析結(jié)果是不會(huì)不理想的。
43、針對(duì)頭孢曲松，噻肟、他定等頭孢三代的無(wú)菌檢驗(yàn)，用頭孢菌素酶效果明顯比青霉素酶好。
44、抗生素效價(jià)測(cè)定時(shí)，加液時(shí)特別要控制好加液量，使用相同的鋼管和用加液搶定量加入相結(jié)合，保證加液量的一致，這樣平行性好的不得了。
45、消糜栓：按《中國(guó)藥典》2015年版測(cè)定含量，人參皂苷Re對(duì)照品對(duì)柱子的選擇性要求很高，在40℃用250mm的柱子，不出峰，但25℃用150mm的柱子出峰。
46、抗生素的效價(jià)測(cè)定時(shí)加菌量一定要準(zhǔn)確，否則結(jié)果會(huì)相差很大，不建議使用10ml的刻度吸管。
47、檢測(cè)硫酸阿米卡星的硫酸鹽，要求在紫色開(kāi)始消失的時(shí)候加50ml乙醇，可是開(kāi)始消失的點(diǎn)不好判斷，一般是在加了5ml多EDTA滴定液之后就加乙醇，滴定結(jié)果一般消耗7-8ml，加的太晚有時(shí)候很難出終點(diǎn)。
48、中藥材及制劑的的浸出物檢測(cè)，溫度影響相當(dāng)大，誤差有時(shí)會(huì)達(dá)到100!
49、做益母草(水蘇堿)、罌粟殼(嗎啡)等生物堿薄層鑒別時(shí)，自制的手工板效果優(yōu)于市場(chǎng)購(gòu)買的預(yù)制板，且展開(kāi)后，要將展開(kāi)劑完全揮掉，可放在烘箱內(nèi)(或加熱板上)80度烘1小時(shí)后，再噴顯色劑。
50、做黃芪含量測(cè)定時(shí)，過(guò)大孔樹(shù)脂柱一步意義不大，完全可以省略，對(duì)結(jié)果沒(méi)有影響，并節(jié)省了時(shí)間和人力物力。
51、做薄層展開(kāi)的時(shí)候，特別是中藥的品種，一定要注意溫度的變化!比如人參就得再10度一下才能分開(kāi)。再就是預(yù)飽和，這個(gè)環(huán)節(jié)也很重要!
52、測(cè)定紅霉素腸溶片釋放度時(shí)，當(dāng)?shù)谝徊绞欠弦?guī)定時(shí)，所用的溶劑(HCl)可以存留，用來(lái)測(cè)定另一批紅霉素腸溶片釋放度的第一步，既經(jīng)濟(jì)又省力。
53、檢測(cè)人參皂苷的時(shí)候，用三氯甲烷和水飽和正丁醇提取的時(shí)候，溫度高的時(shí)候分層快!但是，如果太高的話對(duì)含量有影響。
54、配制溴麝香草酚藍(lán)指示液時(shí)不能超聲或劇烈振搖，否則會(huì)變色。
55、在做頭孢類原料藥時(shí)，頭孢他啶，頭孢呋辛、頭孢泊肟、頭孢拉定等，一定要臨做配對(duì)照品溶液或供試品溶液，因?yàn)轭^孢類普遍不穩(wěn)定。
此外，很多其它的藥品也存在對(duì)溫度、光照、濕度等敏感的現(xiàn)象，要特別注意影響因素。對(duì)于這類不穩(wěn)定的藥品，有時(shí)可能要做系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)，考察主成份與降解產(chǎn)物的分離度等等。
56、麻黃個(gè)提取率普遍偏低，無(wú)論用什么提取方法，溶媒，還多提幾次。所以文獻(xiàn)報(bào)道多用提取量這個(gè)名詞，而不用提取率。
57、在對(duì)藥品進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí)，有時(shí)不能完全按照質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)出來(lái)時(shí)，最簡(jiǎn)單的辦法就是對(duì)比，選取正品或是質(zhì)量較高的藥品對(duì)比進(jìn)行試驗(yàn)，因?yàn)橛行?biāo)準(zhǔn)制定不太標(biāo)準(zhǔn)，特別是以前衛(wèi)生部標(biāo)準(zhǔn)。
58、檢驗(yàn)吲噠帕胺片的含量測(cè)定時(shí)，采用超聲波超聲可使片劑更易分散，主成分溶解完全，沒(méi)有浪費(fèi)，與研磨轉(zhuǎn)移方法比較，對(duì)含量均勻度測(cè)定沒(méi)有影響，且簡(jiǎn)單方便且更合理。
59、生物堿的薄層鑒別顯色問(wèn)題，薄層展開(kāi)后，取出晾干，若太干則稀碘化鉍鉀顯色劑吸附較大，背景干擾大。稍干后，效果較好。
60、在做藥材含量時(shí)，有的要求用索氏提取器提取到溶液無(wú)色而且很多沒(méi)有時(shí)間規(guī)定，在實(shí)際操作過(guò)程中比較麻煩。經(jīng)過(guò)多次反復(fù)多樣品對(duì)比實(shí)驗(yàn)，實(shí)際上回流2.5個(gè)小時(shí)和回流5、6個(gè)小時(shí)所得的結(jié)果差不多。還不如直接回流3小時(shí)。
61、做液相有關(guān)物質(zhì)分析時(shí)，有時(shí)不知道樣品峰里是雜質(zhì)峰還是溶劑峰?？梢宰鰝€(gè)小實(shí)驗(yàn)，加大溶劑里面不同溶劑組分的比例再分別進(jìn)樣，這樣可以在色譜峰中看到溶劑峰有明顯增高的現(xiàn)象。(當(dāng)然是說(shuō)某些品種或某些試劑才會(huì)這樣體現(xiàn)的)。
62、如果展開(kāi)劑成分比較復(fù)雜，一定得板也要放里面飽和，這樣RF值重現(xiàn)性會(huì)比較好。
63、做曲克蘆丁時(shí)，四氫呋喃的量對(duì)實(shí)驗(yàn)的分離度及出峰時(shí)間有很大影響。
64、甲鈷胺見(jiàn)光太易分解了，即使放棕色瓶里，幾個(gè)小時(shí)也會(huì)分解沒(méi)了，在一般保留時(shí)間出現(xiàn)一大峰做有關(guān)物質(zhì)是去包衣與不去包衣一樣。
65、做喜炎平注射液含量測(cè)定時(shí)，加入3,5-二羥基甲苯的乙醇溶液后，應(yīng)當(dāng)精確記時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)要求的5分鐘根本不夠，5分鐘對(duì)照能反應(yīng)完全，而樣品要慢些，所以時(shí)間短了含量不夠。經(jīng)過(guò)很多次的檢驗(yàn)，感覺(jué)30分鐘后二者的反應(yīng)都完全了。如果時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，剛生成的物質(zhì)會(huì)分解。
66、在坐注射用更昔洛韋的鑒別(1)時(shí)，水浴蒸干后滴加氨試液最好沿蒸發(fā)皿壁加入，目標(biāo)物質(zhì)蒸干后都貼在壁上了，肉眼是很難看到的，中心的殘?jiān)粫?huì)出現(xiàn)正反應(yīng)。在做其他類似的在蒸干后的殘?jiān)献鲨b別或其他檢驗(yàn)，也最好要貼壁加，這樣肯定萬(wàn)無(wú)一失。
67、在進(jìn)行益母草以及枸杞子的薄層鑒別時(shí)，展開(kāi)過(guò)程中硅膠板出現(xiàn)花板，并且斑點(diǎn)不明顯，我們換一個(gè)廠家的硅膠板問(wèn)題就解決了，以后出現(xiàn)該問(wèn)題應(yīng)當(dāng)考慮一下硅膠板因素。
68、在溶出度時(shí)，特別是磷酸鹽的介質(zhì)，需測(cè)定PH值，一些藥物對(duì)PH值比較敏感，不同的的PH值下溶出度數(shù)值完全有差別。
69、化學(xué)原料藥鑒別試驗(yàn)要選擇專屬性較強(qiáng)的項(xiàng)目，首選紅外、次選HPLC保留時(shí)間，原則上選擇了專屬性較強(qiáng)的項(xiàng)目，其他專屬性次些的沒(méi)必要放進(jìn)去。
70、在做中藥材的浸出物的檢測(cè)時(shí)，一定要按標(biāo)準(zhǔn)控制好溶劑的濃度(如乙醇等)，否則檢驗(yàn)結(jié)果會(huì)差異很大。
71、藥物分析，所用的試劑質(zhì)量很關(guān)鍵，我們做抗生素的聚合物含量時(shí)，經(jīng)常在聚合物出峰的時(shí)間也出現(xiàn)倒峰，查找了所有儀器和溶劑，最后確定是一個(gè)化學(xué)試劑廠生產(chǎn)的磷酸二氫鈉的原因。
72、在作中藥材薄層層析時(shí)，很多藥材因?yàn)楹恤然蛘甙被鶗?huì)造成跑板拖尾現(xiàn)象或者重疊，這將難以和標(biāo)準(zhǔn)品比對(duì)。建議大家漢羧基的藥可在展開(kāi)劑里面加少量羧酸，含氨基的藥可以在展開(kāi)劑里面加少量三乙胺。
73、有人誤將濃硝酸(在空氣中有“發(fā)煙”現(xiàn)象)作為“發(fā)煙硝酸”使用，進(jìn)行托哌生物堿藥物的硝化-氫氧化鉀呈色鑒別反應(yīng)，結(jié)果不能得到正確的顏色反應(yīng)，造成假陰性結(jié)果。該呈色反應(yīng)的機(jī)理為利用樣品的水解產(chǎn)物莨菪酸，經(jīng)發(fā)煙硝酸加熱硝化為三硝基衍生物，在氫氧化鉀的醇溶液中形成醌型化合物而呈色。
“發(fā)煙硝酸”是指含HNO3達(dá)86-97.5%以上的濃硝酸。而“濃硝酸”雖有”發(fā)煙”現(xiàn)象，但其HNO3僅為69%-71%，用于上述呈色反應(yīng)，會(huì)因?yàn)橄跛釢舛炔蛔愣狗磻?yīng)不完全，形成假陰性結(jié)果。
74、在做人參皂苷RB1和黃芪甲苷時(shí)，如果同實(shí)驗(yàn)室中酸的濃度很高，這兩個(gè)成分都會(huì)分解，從而測(cè)不出含量，所以應(yīng)避免和揮酸時(shí)同時(shí)進(jìn)行含量前處理。
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